获取途径

作者

孙文胜 刘之谦 李新章 姜继康 李杰

作者单位

山东第一医科大学第一附属医院肝胆外科 山东大学齐鲁医学院 孝昌县第一人民医院检验科

刊名

临床医学进展

年份

2023

卷号

第3期

ISSN

2161-8712

关键词

肝细胞癌 miR-485-3p 核受体共激活因子4 铁死亡

摘要

目的：探讨miR-485-3p调控肝癌细胞系HepG2铁死亡的分子机制。方法：使用转染试剂transfect-mate分别转染miR-485-3p模拟物或抑制物至肝癌细胞HepG2中并通过qPCR验证转染效果。加入铁死亡诱导剂索拉非尼，通过CCK-8法检测肝癌细胞增殖水平。通过RT-qPCR验证铁死亡诱导剂作用下肝癌细胞内miR-485-3p表达水平。通过脂质过氧化物试剂盒、C11-BODIPY、铁离子检测试剂盒、分别检测肝癌细胞内过氧化物、铁离子积累水平。Western blot测定转染miR-485-3p模拟物或抑制物后核受体共激活因子4 的表达水平。结果：与“NC + SF”组相比，“Mimics + SF”组肝癌细胞活力减弱，“Inhibitor + SF”组肝癌细胞活力显著增强。qPCR结果显示索拉非尼诱导后，肝癌细胞内miR-485-3p表达水平较对照组升高。“Mimics + SF”组细胞内丙二醛、铁离子水平较“NC + SF”组显著升高。共聚焦显微镜下观察到 “Mimics + SF”组肝癌细胞内ROS累积显著，“Inhibitor + SF”组相对较低。Western...更多

目的：探讨miR-485-3p调控肝癌细胞系HepG2铁死亡的分子机制。方法：使用转染试剂transfect-mate分别转染miR-485-3p模拟物或抑制物至肝癌细胞HepG2中并通过qPCR验证转染效果。加入铁死亡诱导剂索拉非尼，通过CCK-8法检测肝癌细胞增殖水平。通过RT-qPCR验证铁死亡诱导剂作用下肝癌细胞内miR-485-3p表达水平。通过脂质过氧化物试剂盒、C11-BODIPY、铁离子检测试剂盒、分别检测肝癌细胞内过氧化物、铁离子积累水平。Western blot测定转染miR-485-3p模拟物或抑制物后核受体共激活因子4 的表达水平。结果：与“NC + SF”组相比，“Mimics + SF”组肝癌细胞活力减弱，“Inhibitor + SF”组肝癌细胞活力显著增强。qPCR结果显示索拉非尼诱导后，肝癌细胞内miR-485-3p表达水平较对照组升高。“Mimics + SF”组细胞内丙二醛、铁离子水平较“NC + SF”组显著升高。共聚焦显微镜下观察到 “Mimics + SF”组肝癌细胞内ROS累积显著，“Inhibitor + SF”组相对较低。Western blot结果显示转染miR-485-3p模拟物后肝癌细胞内NCOA4表达增强，而转染抑制物后NCOA4表达显著下降。结论：miR-485-3p可以通过调控NCOA4影响肝癌细胞铁死亡。收起

基金

国家自然科学基金

文献类型

期刊

浏览量

9