获取途径

作者

王暖 王欣阳 吉长皓 刘敏 高建刚 孙锦

作者单位

²山东第一医科大学(山东省医学科学院)医学科技创新中心 ³山东大学生命科学学院/实验畸形学教育部重点实验室 ¹山东第一医科大学(山东省医学科学院)实验动物学院

刊名

山东大学耳鼻喉眼学报

年份

2026

卷号

第40卷

期号

第1期

ISSN

1673-3770

关键词

耳蜗毛细胞 邻近标记 重组腺相关病毒 辣根过氧化物酶 细胞表面蛋白质组

分类号

R-332

摘要

目的 开发标记小鼠耳蜗毛细胞的细胞表面蛋白的方法，为测定耳蜗毛细胞表面蛋白质组提供依据。方法 构建在毛细胞中特异性表达一种辣根过氧化物酶融合蛋白的重组腺相关病毒,HRP-TM可以定位到毛细胞膜的外表面。通过显微注射将病毒注射到2 d新生C57BL/6小鼠的后半规管中，30 d时检测听觉脑干反应，并通过基底膜免疫荧光染色检测耳蜗中HRP表达和蛋白标记情况。结果 ABR结果显示，注射病毒的小鼠和未注射病毒的对照小鼠相比，听力无明显差异。基底膜免疫荧光染色结果显示，HRP-TM在毛细胞中特异性表达，内毛细胞的病毒感染效率超过95%，外毛细胞的病毒感染效率达到80%左右。而且，毛细胞的形态和排列与对照相比无明显差异。用荧光偶联链霉亲和素进行免疫荧光染色，只有表达HRP-TM的毛细胞的细胞膜表面有明显荧光信号。

基金

山东省自然科学基金

文献类型

期刊