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作者

姚树桐 苗成 刘庆华 李妍妍 田华 王芸芸 马变颖 方永奇 秦树存

作者单位

泰山医学院动脉粥样硬化研究所 泰山医学院基础医学院 泰山医学院 山东省高校重点实验室 泰山医学院附属医院检验科

刊名

生理学报

年份

2013

卷号

第65卷

期号

第1期

页码

47-54

ISSN

0371-0874

关键词

槲皮素 内质网应激 C/EBP同源蛋白 衣霉素 巨噬细胞 凋亡

分类号

R331.3

摘要

本文旨在研究槲皮素(quercetin,QUE)预处理对内质网应激诱导剂衣霉素(tunicamycin,TM)所致RAW264.7巨噬细胞凋亡的抑制作用,并探讨可能的分子机制。体外培养RAW264.7巨噬细胞,给予20、40和80μmol/LQUE预处理30min,再加入5mg/LTM继续培养12h。分别采用MTT法和Annexin V-FITC双染法检测细胞活力和凋亡情况;免疫荧光细胞化学法和免疫印迹法检测转录激活因子6(activating transcription factor6,ATF6)核转位情况;分别采用免疫印迹法和实时定量聚合酶链反应(real-timePCR)技术检测促凋亡蛋白C/EBP同源蛋白(C/EBP homologous protein,CHOP)和抗凋亡蛋白Bcl-2蛋白及mRNA表达变化。结果显示,QUE(40和80μmol/L)预处理显著抑制TM所诱导的细胞活力降低和凋亡。与TM处理组比较,QUE预处理组内质网应激感受器ATF6由胞浆向核内转移明显减弱。TM在蛋白和转录水平均明显上调CHOP表达,并下调Bcl-2表达,而QUE则明显抑制上述变化,且呈浓度...更多

本文旨在研究槲皮素(quercetin,QUE)预处理对内质网应激诱导剂衣霉素(tunicamycin,TM)所致RAW264.7巨噬细胞凋亡的抑制作用,并探讨可能的分子机制。体外培养RAW264.7巨噬细胞,给予20、40和80μmol/LQUE预处理30min,再加入5mg/LTM继续培养12h。分别采用MTT法和Annexin V-FITC双染法检测细胞活力和凋亡情况;免疫荧光细胞化学法和免疫印迹法检测转录激活因子6(activating transcription factor6,ATF6)核转位情况;分别采用免疫印迹法和实时定量聚合酶链反应(real-timePCR)技术检测促凋亡蛋白C/EBP同源蛋白(C/EBP homologous protein,CHOP)和抗凋亡蛋白Bcl-2蛋白及mRNA表达变化。结果显示,QUE(40和80μmol/L)预处理显著抑制TM所诱导的细胞活力降低和凋亡。与TM处理组比较,QUE预处理组内质网应激感受器ATF6由胞浆向核内转移明显减弱。TM在蛋白和转录水平均明显上调CHOP表达,并下调Bcl-2表达,而QUE则明显抑制上述变化,且呈浓度依赖性。以上结果表明,QUE可减轻TM所诱导的RAW264.7巨噬细胞凋亡,可能是部分通过抑制ATF6-CHOP信号途径实现的。收起

学科

【教育部学科】医学

文献类型

期刊

浏览量

67