获取途径

作者

陈慧敏 李霞 郎娅婷 盛清浩 吕智美

作者单位

²山东大学附属省立医院肾内科 ¹山东第一医科大学附属省立医院肾内科

刊名

临床内科杂志

年份

2023

卷号

第40卷

期号

第2期

页码

122-126

ISSN

1001-9057

关键词

脂多糖 足细胞 白细胞介素-1受体相关激酶1 肿瘤坏死因子受体相关因子6

分类号

R587.2;R692.9

摘要

目的 探讨白细胞介素-1受体相关激酶1在脂多糖诱导的足细胞损伤中的作用及其机制。方法 将体外培养的永生化人足细胞分为5组：正常对照组、LPS组、LPS+空载转染组、LPS+IRAK1干扰质粒转染组、LPS+肿瘤坏死因子受体相关因子6干扰质粒转染组。采用蛋白质免疫印迹法及实时荧光定量聚合酶链反应分别检测5组足细胞IRAK1和TRAF6蛋白及其mRNA的相对表达水平；采用免疫荧光检测5组足细胞紧密连接蛋白-1、结蛋白的定位及相对表达水平；采用Western Blot检测5组足细胞IL-1β、IL-6、肿瘤坏死因子-α、人核因子-κB抑制蛋白α、NF-κB、磷酸化NF-κB蛋白的相对表达水平；采用免疫共沉淀实验检测IRAK1和TRAF6结合情况。结果 LPS组足细胞IRAK1、TRAF6蛋白及mRNA相对表达水平均高于control组，LPS+si-IRAK1组足细胞上述指标均低于LPS组。LPS组、LPS+si-NC组足细胞Desmin、IL-1β、IL-6、TNF-α、p65、p-p65蛋白相对表达水平均高于control组，ZO-1、IKB-α蛋白相对表达水平均低于control组；L...更多

目的 探讨白细胞介素-1受体相关激酶1在脂多糖诱导的足细胞损伤中的作用及其机制。方法 将体外培养的永生化人足细胞分为5组：正常对照组、LPS组、LPS+空载转染组、LPS+IRAK1干扰质粒转染组、LPS+肿瘤坏死因子受体相关因子6干扰质粒转染组。采用蛋白质免疫印迹法及实时荧光定量聚合酶链反应分别检测5组足细胞IRAK1和TRAF6蛋白及其mRNA的相对表达水平；采用免疫荧光检测5组足细胞紧密连接蛋白-1、结蛋白的定位及相对表达水平；采用Western Blot检测5组足细胞IL-1β、IL-6、肿瘤坏死因子-α、人核因子-κB抑制蛋白α、NF-κB、磷酸化NF-κB蛋白的相对表达水平；采用免疫共沉淀实验检测IRAK1和TRAF6结合情况。结果 LPS组足细胞IRAK1、TRAF6蛋白及mRNA相对表达水平均高于control组，LPS+si-IRAK1组足细胞上述指标均低于LPS组。LPS组、LPS+si-NC组足细胞Desmin、IL-1β、IL-6、TNF-α、p65、p-p65蛋白相对表达水平均高于control组，ZO-1、IKB-α蛋白相对表达水平均低于control组；LPS+si-IRAK1组、LPS+si-TRAF6组足细胞Desmin、IL-1β、IL-6、TNF-α、p65、p-p65蛋白相对表达水平均低于LPS组、LPS+si-NC组，ZO-1、IKB-α蛋白相对表达水平均高于LPS组、LPS+si-NC组。Co-IP实验结果显示IRAK1与TRAF6存在结合。结论 LPS诱导足细胞发生损伤并激活炎症反应，调控IRAK1通过靶向TRAF6/NF-κB通路减轻LPS导致的足细胞损伤。收起

文献类型

期刊

浏览量

32