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作者

张栋栋 王珺琳 司书轩 马葆泽 江美旭 景钰莹 吕智美 王荣

作者单位

山东第一医科大学附属省立医院肾内科

刊名

临床内科杂志

年份

2026

卷号

第1期

ISSN

1001-9057

关键词

DExH盒解旋酶9 足细胞 糖尿病肾脏疾病 胰岛素样生长因子2mRNA结合蛋白1 炎症

分类号

R692.6

摘要

目的 探讨DExH盒解旋酶9在糖尿病肾脏疾病足细胞损伤中的表达变化及其潜在机制。方法 将12只8周龄C57BL/6J雄性小鼠随机分为对照组与DKD组,每组各6只;以链脲佐菌素诱导建立DKD模型。同时收集对照组与DKD患者肾组织标本,采用免疫组化检测肾小球中DHX9的表达水平。体外培养人永生化足细胞,建立高糖模型并分别设立正常糖、高糖、高渗透压和空白对照、转染对照、DHX9敲低、DHX9过表达、高糖+转染对照、高糖+DHX9敲低、过表达DHX9+胰岛素样生长因子2 mRNA结合蛋白1敲低10个组别。采用实时荧光定量逆转录PCR检测DHX9 mRNA相对表达水平;采用蛋白质印迹法和免疫荧光检测DHX9及足细胞损伤相关蛋白与炎症因子表达水平;采用CCK-8评估细胞活性;采用免疫共沉淀验证DHX9与IGF2BP1的结合。结果 DKD小鼠与患者肾小球DHX9表达水平均较高于各自对照组;高糖刺激可显著上调足细胞DHX9 mRNA和蛋白表达。si-DHX9显著降低DHX9表达,并在高糖条件下上调synaptopodin、ZO-1、下调Desmin,同时降低IL-1β、IL-6、TNF-α;免疫荧光结...更多

目的 探讨DExH盒解旋酶9在糖尿病肾脏疾病足细胞损伤中的表达变化及其潜在机制。方法 将12只8周龄C57BL/6J雄性小鼠随机分为对照组与DKD组,每组各6只;以链脲佐菌素诱导建立DKD模型。同时收集对照组与DKD患者肾组织标本,采用免疫组化检测肾小球中DHX9的表达水平。体外培养人永生化足细胞,建立高糖模型并分别设立正常糖、高糖、高渗透压和空白对照、转染对照、DHX9敲低、DHX9过表达、高糖+转染对照、高糖+DHX9敲低、过表达DHX9+胰岛素样生长因子2 mRNA结合蛋白1敲低10个组别。采用实时荧光定量逆转录PCR检测DHX9 mRNA相对表达水平;采用蛋白质印迹法和免疫荧光检测DHX9及足细胞损伤相关蛋白与炎症因子表达水平;采用CCK-8评估细胞活性;采用免疫共沉淀验证DHX9与IGF2BP1的结合。结果 DKD小鼠与患者肾小球DHX9表达水平均较高于各自对照组;高糖刺激可显著上调足细胞DHX9 mRNA和蛋白表达。si-DHX9显著降低DHX9表达,并在高糖条件下上调synaptopodin、ZO-1、下调Desmin,同时降低IL-1β、IL-6、TNF-α;免疫荧光结果与Western blot一致。CCK-8结果显示,HG组细胞存活率均显著低于NG组和HG+si-DHX9组。CO-IP提示DHX9与IGF2BP1互作;在DHX9过表达背景下敲低IGF2BP1可提高synaptopodin、ZO-1并降低IL-1β、TNF-α,同时改善OE-DHX9导致的细胞活性下降。结论 DHX9在DKD足细胞损伤中表达上调,可能通过调控IGF2BP1促进炎症与损伤,提示其为潜在干预靶点。收起

基金

国家自然科学基金

文献类型

期刊