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作者

杨美琳 卢上伟 申宁 柴守宇 王荣 吕智美

作者单位

山东第一医科大学附属省立医院肾内科

刊名

临床内科杂志

年份

2024

卷号

第11期

ISSN

1001-9057

关键词

足细胞 热休克转录因子2 细胞焦亡 NOD样受体蛋白3炎症小体 活性氧

分类号

R587.2;R692.9

摘要

目的 探讨热休克转录因子2在糖尿病肾脏疾病足细胞焦亡与损伤发生中的作用机制。方法 将12只C57BL/6J雄性小鼠随机均分为对照组和DKD组,采用免疫组化染色检测DKD组小鼠肾脏组织中HSF2的表达。体外培养永生化人足细胞,构建高糖诱导的足细胞损伤模型,将足细胞分为低糖组、高糖组、高渗组、高糖+过表达对照组、高糖+HSF2过表达组、低糖+敲低对照组、低糖+HSF2敲低组、空白对照组、敲低对照组、HSF2敲低组、HSF2敲低+ROS抑制剂组。采用实时荧光定量聚合酶链反应、蛋白质印迹法及免疫荧光检测足细胞损伤相关蛋白zo-1、synaptopodin的表达水平;Western blot评估足细胞中HSF2蛋白、NOD样受体蛋白3炎症小体和焦亡相关蛋白cleaved-Caspase-1、IL-1β蛋白的表达水平;线粒体超氧化物红色荧光探针试剂盒检测足细胞线粒体超氧化物水平。结果 与对照组相比,DKD组小鼠肾组织中HSF2表达显著降低。HG组足细胞NLRP3、Cleaved-Caspase-1、IL-1β相对表达水平均高于LG组、HO组和HG+OE-HSF2组,HSF2表达水平均低于LG组和H...更多

目的 探讨热休克转录因子2在糖尿病肾脏疾病足细胞焦亡与损伤发生中的作用机制。方法 将12只C57BL/6J雄性小鼠随机均分为对照组和DKD组,采用免疫组化染色检测DKD组小鼠肾脏组织中HSF2的表达。体外培养永生化人足细胞,构建高糖诱导的足细胞损伤模型,将足细胞分为低糖组、高糖组、高渗组、高糖+过表达对照组、高糖+HSF2过表达组、低糖+敲低对照组、低糖+HSF2敲低组、空白对照组、敲低对照组、HSF2敲低组、HSF2敲低+ROS抑制剂组。采用实时荧光定量聚合酶链反应、蛋白质印迹法及免疫荧光检测足细胞损伤相关蛋白zo-1、synaptopodin的表达水平;Western blot评估足细胞中HSF2蛋白、NOD样受体蛋白3炎症小体和焦亡相关蛋白cleaved-Caspase-1、IL-1β蛋白的表达水平;线粒体超氧化物红色荧光探针试剂盒检测足细胞线粒体超氧化物水平。结果 与对照组相比,DKD组小鼠肾组织中HSF2表达显著降低。HG组足细胞NLRP3、Cleaved-Caspase-1、IL-1β相对表达水平均高于LG组、HO组和HG+OE-HSF2组,HSF2表达水平均低于LG组和HO组,synaptopodin、zo-1蛋白和mRNA相对表达水平均低于LG组和HG+OE-HSF2组。与LG+si-NC组相比,LG+si-HSF2组足细胞synaptopodin、zo-1蛋白和mRNA相对表达水平均显著降低,NLRP3、IL-1β、Cleaved-Caspase-1相对表达水平均显著升高。与LG组相比,HG组及LG+si-HSF2组足细胞mtROS均明显增加;与HG组相比,HG+OE-HSF2组足细胞mtROS明显减少;与con组相比,si-HSF2组和si-HSF2+MT组足细胞mtROS均明显增加。结论 HSF2通过调控ROS/NLRP3信号通路介导高糖诱导的足细胞焦亡与损伤。收起

基金

山东省自然科学基金

文献类型

期刊

浏览量

8