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作者

米传靓 付彬 李思迪 陈志达 郭中坤 张振宇 王可洲

作者单位

¹山东第一医科大学(山东省医学科学院)实验动物学院(省实验动物中心) ²济南朋悦实验动物繁育有限公司

刊名

中国实验动物学报

年份

2023

卷号

第31卷

期号

第8期

页码

1021-1027

ISSN

1005-4847

关键词

血管紧张素受体1a Lbp^-/-小鼠 原代肝细胞 抑制剂 干扰RNA 细胞外信号调节激酶/磷酸化细胞外信号调节激酶

分类号

R-332

摘要

目的 基于LBP敲除小鼠原代肝细胞探讨LBP缺失后Agtr1a调节LPS诱导炎症的作用。方法 通过两步灌流法提取WT组、Lbp组小鼠原代肝细胞，构建LPS诱导的原代肝细胞炎症模型；分别采取加入抑制剂氯沙坦、转染siRNA两种方法抑制Lbp小鼠原代肝细胞Agtr1a表达；抑制剂法将细胞分为对照组A、LPS组A、抑制剂氯沙坦组,转染siRNA法将细胞分为对照组B、LPS组B、阴性对照组、干扰组;WT组小鼠原代肝细胞则分为对照组、LPS组。本研究利用Western Blot验证Lbp小鼠原代肝细胞中LBP蛋白敲除情况，从WT组、Lbp组小鼠原代肝细胞的Western Blot方面验证Agtr1a在LPS刺激下的变化情况，使用CCK8、qPCR、Western Blot等方法探讨抑制剂氯沙坦及si-agtr1a对Lbp小鼠原代肝细胞炎症的抑制情况。结果 Lbp小鼠原代肝细胞中LBP蛋白已敲除完全；与WT组相比，在LPS诱导下Lbp小鼠原代肝细胞Agtr1a表达显著升高;抑制剂组细胞存活率显著升高;抑制剂组以及干扰组的炎症因子表达显著降低,同时与炎症相关蛋白p-ERK的表达也显著降低。结论 LP...更多

目的 基于LBP敲除小鼠原代肝细胞探讨LBP缺失后Agtr1a调节LPS诱导炎症的作用。方法 通过两步灌流法提取WT组、Lbp组小鼠原代肝细胞，构建LPS诱导的原代肝细胞炎症模型；分别采取加入抑制剂氯沙坦、转染siRNA两种方法抑制Lbp小鼠原代肝细胞Agtr1a表达；抑制剂法将细胞分为对照组A、LPS组A、抑制剂氯沙坦组,转染siRNA法将细胞分为对照组B、LPS组B、阴性对照组、干扰组;WT组小鼠原代肝细胞则分为对照组、LPS组。本研究利用Western Blot验证Lbp小鼠原代肝细胞中LBP蛋白敲除情况，从WT组、Lbp组小鼠原代肝细胞的Western Blot方面验证Agtr1a在LPS刺激下的变化情况，使用CCK8、qPCR、Western Blot等方法探讨抑制剂氯沙坦及si-agtr1a对Lbp小鼠原代肝细胞炎症的抑制情况。结果 Lbp小鼠原代肝细胞中LBP蛋白已敲除完全；与WT组相比，在LPS诱导下Lbp小鼠原代肝细胞Agtr1a表达显著升高;抑制剂组细胞存活率显著升高;抑制剂组以及干扰组的炎症因子表达显著降低,同时与炎症相关蛋白p-ERK的表达也显著降低。结论 LPS刺激Lbp小鼠原代肝细胞后Agtr1a表达上调能够代偿脂多糖结合蛋白的作用来促进炎症的发生，抑制Agtr1a表达能显著降低LPS诱导的Lbp小鼠原代肝细胞炎症反应。收起

基金

山东省医药卫生科技发展计划项目

文献类型

期刊

浏览量

28