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作者

米传靓 付彬 李思迪 陈志达 郭中坤 王可洲

作者单位

¹山东第一医科大学(山东省医学科学院)实验动物学院(省实验动物中心) ²济南朋悦实验动物繁育有限公司

刊名

中国比较医学杂志

年份

2024

卷号

第34卷

期号

第5期

页码

84-91

ISSN

1671-7856

关键词

肾上腺素受体α1A型受体 Lbp^-/-小鼠 原代肝细胞 哌唑嗪 干扰RNA MAPK信号通路

分类号

R575

摘要

目的 探究Adra1a调节LPS诱导的LBP敲除小鼠原代肝细胞炎症反应。方法 利用二步灌流法提取WT型、Lbp型小鼠原代肝细胞，构建由LPS诱发的原代肝细胞原发炎症模型；采用加入抑制剂哌唑嗪、转染siRNA来下调LBP敲除小鼠原代肝细胞Adra1a的表达；抑制剂法将原代肝细胞分为3组分别是对照组A、LPS组A、抑制剂哌唑嗪组，转染siRNA主要是对原代肝细胞进行分组，包括对照组B、LPS组B、si-NC组、si-Adra1a组；将WT型小鼠的原代肝细胞分为两组分别为对照组、LPS组。本研究以WT型、Lbp型小鼠原代肝细胞为研究对象利用Western blot方法验证Adra1a在LPS刺激下的变化情况，采用CCK-8、qRT-PCR、Western blot等实验方法验证哌唑嗪及si-Adra1a对Lbp小鼠的原代肝细胞的炎症及存活率的改善情况。结果 在LPS刺激下Lbp小鼠的原代肝细胞Adra1a蛋白表达显著升高,而野生型没有显著变化；抑制剂哌唑嗪组及干扰组的细胞存活率显著升高;抑制剂哌唑嗪组及si-Adra1a组的TNF-α、IL-1β炎症因子表达情况显著降低,与细胞损伤及炎症相关...更多

目的 探究Adra1a调节LPS诱导的LBP敲除小鼠原代肝细胞炎症反应。方法 利用二步灌流法提取WT型、Lbp型小鼠原代肝细胞，构建由LPS诱发的原代肝细胞原发炎症模型；采用加入抑制剂哌唑嗪、转染siRNA来下调LBP敲除小鼠原代肝细胞Adra1a的表达；抑制剂法将原代肝细胞分为3组分别是对照组A、LPS组A、抑制剂哌唑嗪组，转染siRNA主要是对原代肝细胞进行分组，包括对照组B、LPS组B、si-NC组、si-Adra1a组；将WT型小鼠的原代肝细胞分为两组分别为对照组、LPS组。本研究以WT型、Lbp型小鼠原代肝细胞为研究对象利用Western blot方法验证Adra1a在LPS刺激下的变化情况，采用CCK-8、qRT-PCR、Western blot等实验方法验证哌唑嗪及si-Adra1a对Lbp小鼠的原代肝细胞的炎症及存活率的改善情况。结果 在LPS刺激下Lbp小鼠的原代肝细胞Adra1a蛋白表达显著升高,而野生型没有显著变化；抑制剂哌唑嗪组及干扰组的细胞存活率显著升高;抑制剂哌唑嗪组及si-Adra1a组的TNF-α、IL-1β炎症因子表达情况显著降低,与细胞损伤及炎症相关的蛋白p-p38、p-ERK、p-JNK的表达量也显著降低。结论 LPS刺激Lbp小鼠原代肝细胞后Adra1a表达上调、炎症信号因子上调，使用哌唑嗪与si-Adra1a特异性降低Adra1a表达后使LPS相关的Lbp小鼠原代肝细胞炎症因子明显下降，可验证敲除LBP导致Adra1a在LPS诱导的炎症调节中参与反应。收起

基金

山东省医药卫生科技发展计划项目

学科

【教育部学科】医学

文献类型

期刊

浏览量

7