获取途径

作者

谢荣现 程龙云 袁西露 李丽 贾海红 李冰清

作者单位

山东第一医科大学(山东省医学科学院)临床与基础医学院(基础医学研究所)

刊名

中国人兽共患病学报

年份

2025

卷号

第41卷

期号

第8期

页码

824-831

ISSN

1002-2694

关键词

嗜血分枝杆菌 EsxA EsxB 蛋白提取 荧光共定位

分类号

R378.91

摘要

目的 获取嗜血分枝杆菌毒力因子EsxA、EsxB蛋白，探讨体内外互作，分析EsxA、EsxB的功能机制，为靶向嗜血分枝杆菌药物研发奠定基础。方法 以嗜血分枝杆菌毒力因子EsxA、EsxB生物信息学分析为基础，使用嗜血分枝杆菌作为模板进行分子克隆，分别构建EsxA-pGl01、EsxB-pGl01和EsxB-pET-29b重组质粒，使用原核体系表达EsxA、EsxB和EsxA-EsxB的蛋白，通过镍柱亲和层析柱和凝胶过滤色谱法获取纯化蛋白。使用荧光共定位确定细胞内共定位。结果 成功构建了EsxA、EsxB和EsxA-EsxB原核表达系统，获取了EsxA-EsxB纯化蛋白。荧光共定位确定EsxA、EsxB具有体内互作。结论 体内荧光共定位和体外复合物预示了EsxA和EsxB可以在体内外发生互作，为研究嗜血分枝杆菌毒力因子EsxA、EsxB的致病机制和复合物结构解析奠定基础。

基金

国家自然科学基金;山东省自然科学基金

文献类型

期刊

浏览量

1