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作者

李欣贤 张晓丹 刘晶晶 苗增民 张涛涛 柴同杰

作者单位

泰山医学院生命科学学院 山东农业大学动物科技与动物医学学院 石家庄兽用生物制品供应站

刊名

中国畜牧兽医

年份

2014

卷号

第4期

页码

89-94

ISSN

1671-7236

关键词

猪繁殖与呼吸综合征病毒 糖基化囊膜蛋白5 重组蛋白 ELISA Western blotting

分类号

S852.651

摘要

为分析猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)糖基化囊膜蛋白5(GP5)的免疫原性,本研究通过提取PRRSV分离株(GenBank登录号:HQ701732.1)RNA和RT-PCR扩增得到开放阅读框5(ORF5)基因。根据ORF5的基因序列,设计2对引物,经PCR扩增分别获得不含信号肽和跨膜功能区的2段基因片段。利用酶切位点,将2段基因连接到原核表达载体pET-28a(+)上,获得重组表达质粒pET28a-GP5。将重组质粒导入BL21(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导获得表达。经Western blotting鉴定,重组蛋白可被PRRSV阳性血清识别。将纯化的重组蛋白免疫BALB/c小鼠,ELISA方法检测,小鼠能产生针对蛋白的血清抗体。因此,该重组PRRSV GP5蛋白具有良好的生物学活性,为进一步研究GP5蛋白的结构和功能奠定基础。

基金

国家科技支撑计划

学科

【教育部学科】农学

文献类型

期刊

浏览量

8