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作者

张姝 张伟 姜树原 张颜波 吴松泉 黄丽华 孟宪梅 吉训明 邵国

作者单位

包头医学院生物医学研究中心 包头医学院基础医学院 包头医学院第二附属医院消化科,包头医学院基础医学院 丽水学院医学院,包头医学院基础医学院 泰山医学院附属医院神经内科,包头医学院基础医学院 首都医科大学宣武医院神经内科首都医科大学宣武医院神经再生教育部重点实验室,包头医学院基础医学院

刊名

肿瘤防治研究

年份

2013

卷号

第40卷

期号

第12期

页码

1128-1133

ISSN

1000-8578

关键词

DNA甲基转移酶3B 293A细胞 细胞增殖 p21

分类号

Q291

摘要

目的构建DNA甲基转移酶3B（DNMT3B）的一种异构体387的真核质粒表达载体，在体外评价其对人胚肾细胞株293A增殖影响。方法据GenBank中．＆DNMT387cDNA序列设计并合成特异性引物，以RDNMT381为模板，利用高保真Taq酶，进行PCR技术扩增DNMT387，并将扩增产物克隆到真核表达载体pcMv-2B中。将携带DNMT387基因的质粒pcMv_DNMT387及空质粒pcMV-2B转染293A细胞，通过G418筛选出稳定表达的细胞系．MTT法检测细胞的增殖：流式细胞仪检测细胞的细胞周期分布。同时检测p21蛋白表达情况。结果成功构建DNMT387的真核表达载体并筛选出稳定表达株，与转染空质粒组相比，稳定过表达DNMT387组293A细胞株增殖减慢（P〈0．01）；过表达DNMT387的293A细胞s期细胞比例显著增多（P〈0．05）。P21mRNA和蛋白表达增加（P〈0．05）。结论DNMT387基因过表达可抑制293AN胞增殖，p21可能参与了这一过程的调节。

基金

国家自然科学基金;内蒙古自然科学基金

文献类型

期刊

浏览量

37