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作者

张姝 张伟 姜树原 张颜波 吴松泉 黄丽华 孟宪梅 吉训明 邵国

作者单位

泰山医学院附属医院神经内科 首都医科大学宣武医院 神经再生教育部重点实验室 首都医科大学宣武医院神经内科 包头医学院生物医学研究中心 包头医学院第二附属医院消化科 丽水学院医学院 包头医学院基础医学院

刊名

肿瘤防治研究

年份

2013

卷号

第12期

页码

1128-1133

ISSN

1000-8578

关键词

DNA甲基转移酶3B 293A细胞 细胞增殖 p21

分类号

R363

摘要

目的构建DNA甲基转移酶3B(DNMT3B)的一种异构体3B7的真核质粒表达载体,在体外评价其对人胚肾细胞株293A增殖影响。方法据GenBank中人DNMT3B7 cDNA序列设计并合成特异性引物,以DNMT3B1为模板,利用高保真Taq酶,进行PCR技术扩增DNMT3B7,并将扩增产物克隆到真核表达载体pCMV-2B中。将携带DNMT3B7基因的质粒pCMV-DNMT3B7及空质粒pCMV-2B转染293A细胞,通过G418筛选出稳定表达的细胞系,MTT法检测细胞的增殖;流式细胞仪检测细胞的细胞周期分布。同时检测p21蛋白表达情况。结果成功构建DNMT3B7的真核表达载体并筛选出稳定表达株,与转染空质粒组相比,稳定过表达DNMT3B7组293A细胞株增殖减慢(P<0.01);过表达DNMT3B7的293A细胞S期细胞比例显著增多(P<0.05)。p21 mRNA和蛋白表达增加(P<0.05)。结论 DNMT3B7基因过表达可抑制293A细胞增殖,p21可能参与了这一过程的调节。

基金

国家自然科学基金;内蒙古自然科学基金

学科

【教育部学科】医学

文献类型

期刊

浏览量

22